[求救] qpcr SYBR Green 試劑量不足

看板Biotech作者 (Larva)時間8年前 (2016/06/17 10:59), 編輯推噓7(7推 0噓 9→)
留言16則, 10人參與, 最新討論串1/1
不好意思，要問個小蠢問題 剛剛要去上qpcr （使用0.1 ml 96孔盤），我的總體積量平常都是加20ul (含2ul cDNA) 準備要配的時候發現我的SYBR不夠了，不知道可不可以總體積量改成10ul (1ul cDNA)? 盤子太大會不會測不到？？ 機器為ABI step one 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 114.136.27.193 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1466132367.A.C12.html
推
06/17 11:24, , 1F
不會測不到只是訊號弱,而且1ul會比2ul不準
06/17 11:24, 1F
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06/17 12:52, , 2F
從來都只用 10 uL 上機......
06/17 12:52, 2F
推
06/17 13:33, , 3F
10ul就是考驗實驗功力，手巧就可以
06/17 13:33, 3F
推
06/17 18:51, , 4F
都是10+1
06/17 18:51, 4F
推
06/17 21:15, , 5F
以上都是血汗的384盤勞工 Q_Q
06/17 21:15, 5F
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06/18 00:57, , 6F
沒耶，我是 96 XD 只是為了省 reagent
06/18 00:57, 6F
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06/18 02:20, , 7F
10ul+1 XD
06/18 02:20, 7F
推
06/18 22:28, , 8F
10+1 384每次加完都很想死
06/18 22:28, 8F
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06/20 01:16, , 9F
現在還有人在上384？！
06/20 01:16, 9F
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06/20 01:17, , 10F
我後來試了10ul, ct值好像變得很低
06/20 01:17, 10F
推
06/20 23:28, , 11F
都只用 10 uL 上機XD 我也是用step one 96孔
06/20 23:28, 11F
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06/20 23:29, , 12F
384也是10 ul 我是省reagent 也順便省時間 (省三個工作天)
06/20 23:29, 12F
推
06/23 13:12, , 13F
10ul +1, 我比較好奇有沒有版友做one-step RT-qPCR的？
06/23 13:12, 13F
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06/24 11:19, , 14F
後來把那天的幾個sample拿來用20ul重跑，ct值一樣，害我
06/24 11:19, 14F
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06/24 11:19, , 15F
原本擔心的要死，所以，我決定要跟各位大大一樣用10ul就好
06/24 11:19, 15F
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06/24 11:19, , 16F
XDDD，多謝各位！
06/24 11:19, 16F
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