[求救] 小鼠血清製備

看板Biotech作者 (handsome)時間8年前 (2016/05/30 20:40), 8年前編輯推噓2(2推 0噓 9→)
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小鼠以毛細管眼窩採血後，4度靜置4小時，然後5000xg 30 min，這是參照學長姐的作法 (已畢業)，但取出的血清會有些偏紅，想請問大家該如作才不會造成溶血，謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.120.104.81 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1464612031.A.04A.html
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05/30 21:02, , 1F
你的抗溶血劑?
05/30 21:02, 1F
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05/30 21:15, , 2F
不要放在冰上，維持室溫，降低離心力，避免RBC破裂
05/30 21:15, 2F
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05/30 21:16, , 3F
最好是採完血就立刻分離血清
05/30 21:16, 3F
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05/30 22:31, , 4F
沒聽過抗溶血劑
05/30 22:31, 4F
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05/30 23:44, , 5F
採完立刻離心，室溫下3000~5000rpm即可
05/30 23:44, 5F
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06/01 20:38, , 6F
我是用 1300g 10min室溫
06/01 20:38, 6F
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06/01 20:40, , 7F
然後我是用 EDTA管 不能超過規定的體積
06/01 20:40, 7F
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06/01 20:42, , 8F
以上是血漿，血清 要等到凝固在離心
06/01 20:42, 8F
推
06/02 10:36, , 9F
5000g... 1000g上下就差不多了，約莫3-5k rpm
06/02 10:36, 9F
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06/02 10:37, , 10F
低溫會讓你凝血不是很完全，室溫30min~60min就上離心機
06/02 10:37, 10F
因為我有30幾隻，無法採完立馬離心，我有嘗試3000和1000rpm，3000rpm大多溶血， 1000rpm少部分會，不過都是在4度凝固，我會試試看室溫離心，謝謝大家的建議 ※ 編輯: bill00202000 (140.120.104.80), 06/04/2016 15:15:08
推
06/04 15:21, , 11F
30幾隻可以用一半先離，我放置到2-3小時都還OK，不要隔天
06/04 15:21, 11F
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