[求救] 重組DNA

看板Biotech作者 (childlike107)時間8年前 (2016/05/06 19:34), 編輯推噓2(2推 0噓 4→)
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請問 用限制酶切開原載體與目標基因 將目標基因與pcDNA3.1(+)接合,轉型,純化DNA 之後將質體DNA transfection至細胞表達 中間過程需要PCR嗎 還是這樣就可以表現? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.123.219.73 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1462534456.A.FBD.html
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05/06 20:01, , 1F
目標基因音如果不是 PCR 來的，整個過程就不需要 PCR
05/06 20:01, 1F
推
05/06 23:05, , 2F
只要你的target gene 已經存在於其他vector就不用
05/06 23:05, 2F
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05/07 09:31, , 3F
切下targer為 切位+序列..ATG...序列+切位 送pcDNA
05/07 09:31, 3F
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05/07 09:34, , 4F
序列非一開始即ATG有影響嗎 感謝
05/07 09:34, 4F
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05/07 11:06, , 5F
你要確定一下從ATG開始之後的蛋白序列是不是你要的。
05/07 11:06, 5F
推
05/07 12:15, , 6F
reading frame是對的就行了,切完跑個電泳分離一下吧
05/07 12:15, 6F
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