[求救] OCT 包埋後液態氮急速冷凍後 切片問題
想請教一下 液態氮急速冷凍對於OCT 有無影響?
會這樣問主要是因為急速冷凍後置入-80 冰箱
切片時將機器溫度調整 10, 15, 20 度 (不同時間點做的)
無論在哪一個溫度處理下 都發現拉片時 ＯＣＴ 部分看起來
都有點皺皺的拉到底時切片容易凹凸不平 也就是很難貼齊平台
後續黏片時非常容易有皺摺或氣泡～（貼肌肉組織不會；乾冰急速冷凍）
我的方法與步驟如下
小鼠灌流4% PFA 後取大腦組織
PFA 固定 overnight
30% Sucrose 脫水兩天
拭鏡紙吸乾外圍水分置入包埋盒 (內含OCT)
浸潤 30分鐘後進行液態氮冷凍
不知是否有人有相關經驗或是可以給建議~感激不盡！
ㄑb
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