MSC繼代不貼盤

看板Biotech作者時間8年前 (2016/03/09 16:21), 編輯推噓3(3推 0噓 16→)
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人類骨髓MSC 以alpha-men +16.6%FBS+1%三合一抗生素培養 繼代時用0.5ml trypsin/10cm dish作用3min 以auto-pipette沖下收集並離心 數完細胞回種 隔天發現細胞都不貼盤 請問可能出了什麼問題?? 謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.57.147 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1457511666.A.42D.html
推
03/09 16:22, , 1F
索性改3D Culture吧(大誤~
03/09 16:22, 1F
推
03/09 16:50, , 2F
第一代有長到快八分滿嗎? MSC 很好貼 不貼可能死了...
03/09 16:50, 2F
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03/09 16:51, , 3F
分盤時的密度? 分盤比例?
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03/09 17:01, , 4F
有到8分滿才分盤
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通常是1分10
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03/09 17:02, , 6F
打下來要種到6 well做實驗的也不貼
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一分10太稀 而且如果你門沒有特製配方 MSC 不好養
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甚至1分2 1分3 還得長很久
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03/09 17:13, , 9F
MSC 配方很多種 養起來生長速度也差很多
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1分10太稀…
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03/10 14:55, , 11F
為了避免MSC老化 而用低密度培養
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03/10 14:57, , 12F
seeding的細胞有一定數量 也不會太稀
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03/10 15:55, , 13F
你們lab有成功培養過嗎? lab過去的人也這樣養嗎?
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03/10 15:56, , 14F
hBM-MSC 直覺上還真是不易取得的材料
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03/10 15:58, , 15F
數一數再種很謹慎不錯 可1分10大多人會覺得太稀
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長很快的細胞才會這樣分
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03/15 16:41, , 17F
之前1分20也有成功 最低有種到10000/10cm dish
03/15 16:41, 17F
推
03/26 17:07, , 18F
以前看別人養大約4000~5000cells/cm2會比較好
03/26 17:07, 18F
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03/26 17:08, , 19F
不過今天的原因是不貼, 是否trypsin作用太久了呢?
03/26 17:08, 19F
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