[求救] 共培養誘導一直失敗
實驗是將小鼠巨噬細胞跟分化的小鼠脂肪細胞共培養(coculture) 誘導發炎
培養方法是用通透膜(transwell)來進行實驗
大概的步驟就是先把前脂肪細胞分化成熟以後用第八天的脂肪細胞(well 下層)
跟巨噬細胞(well上層insert)一起共培養24小時然後收medium和細胞作後續實驗
(巨噬細胞是在共培養前24小時先貼在insert裡面)
目前試過很多條件,包含細胞密度調整跟先加LPS誘導巨噬細胞發炎再共培養
但是初步先測定NO的時候發現細胞都沒有發炎反應.....
但之前單獨用LPS誘導巨噬細胞的時候測NO就會有顯著差異!
所以細胞應該是會正常發炎的才對吧..?
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想請問各位大大有做過類似實驗然後也誘導不出來嗎?
麻煩大家了,謝謝>"<
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