[求救] SYBR做QPCR

看板Biotech作者WMB (踏出改變的第一步)時間8年前 (2016/01/26 11:14)推噓2(2推 0噓 15→)

留言17則, 7人參與討論串1/1

實驗是要從plasma裡萃取cfDNA，再用Q-PCR定量目前的實驗流程是前任助理開發的用Roche High Pure Viral Nucleic Acid Kit萃取DNA 機台是ABI StepOnePlus，使用ABI的Mastermix 現在的狀況是用伯昂代理的ThermoHotStarr Master Mix可以做出PCR產物，但是用ABI的Master Mix做Q-PCR則沒有PCR產物所以我想問的是 1.有哪間廠商還有在賣SYBR Green? 我想要外加到ThermoHotStarr Master Mix來做Q-PCR 已經問過萊富、進階、伯昂、波仕特都沒有，好像這兩年全世界都只想賣SYBR master mix不賣SYBR染劑了 2.自己外加SYBR Green I做Q-PCR除了要再加ROX dye之外有哪些注意事項? 比如使用的濃度或是稀釋用的buffer? 3.還有哪家廠商的SYBR Green Master mix好用? 試用過波仕特最近新代理的，會有雜band。進階的則不給試用包。 4.我有點懷疑Roche這個kit可能不夠力，各位做cfDNA都是用哪家的kit在抽DNA? 感恩 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 110.30.163.201 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1453778077.A.B0E.html

→

blence

01/26 11:27, , 1^F

01/26 11:27, 1^F

→

blence

01/26 11:28, , 2^F

01/26 11:28, 2^F

→

blence

01/26 11:29, , 3^F

01/26 11:29, 3^F

→

blence

01/26 11:31, , 4^F

01/26 11:31, 4^F

謝謝， invitrogen被Thermo-fisher併購，但仍是進階代理 ABI被Life併購又被Thermo-fisher併購，目前仍是萊富代理進階和萊富的業務都幫我查過原廠已經不賣SYBR Green I了只有SYBR Master Mix 明明他們的Taq就不夠強，幹嘛放棄有SYBR需要的客戶啊... ※ 編輯: WMB (110.30.163.201), 01/26/2016 17:57:12

→

blence

01/26 18:25, , 5^F

01/26 18:25, 5^F

→

blence

01/26 19:05, , 6^F

01/26 19:05, 6^F

→

blence

01/26 19:06, , 7^F

01/26 19:06, 7^F