[求救] western 製膠問題

看板Biotech作者 (小欣欣)時間8年前 (2015/08/04 11:04), 編輯推噓7(7推 0噓 9→)
留言16則, 10人參與, 最新討論串1/1
各位大大... 最近換到了新的實驗室，膠就開始出現鬼打牆的漏sample的問題... 主要問題就是在loading sample的時候，sample會從上膠的well中漏到下膠的上緣，大概 兩三次都出現相同的情況...所以開始抓錯: 1.已從副廠玻璃換成原廠 2.重新配製tris 8.8,6.8 3.確定甲醇壓膠時吸乾並揮發完全 4.提高Aps的使用量，並重新於-20解凍新的... 5.非常小心的拔齒疏 但還是會出現這個狀況... 也懷疑是齒疏的問題，但漏的well是隨機的，所以暫時排除.. 有沒有人也遇到相同的問題呢?? 求救...已崩潰!! -- Sent from my Android -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 223.142.27.197 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1438657442.A.88C.html
推
08/04 11:22, , 1F
這樣不就省了上膠跑的時間，會擴散嗎？
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08/04 11:30, , 2F
齒梳比厚玻璃還厚?
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08/04 11:42, , 3F
鋁板有殘膠?
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08/04 11:56, , 4F
Comb太厚吧 gel casting時要很用力插進去嗎
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08/04 12:49, , 5F
是用bio rad原廠1mm的玻璃跟comb,
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就是sample會擴散，導致量不準
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08/04 14:13, , 7F
1mm的comb跟玻璃還蠻特別的,應該不是用0.75或1.5mm？
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推
08/04 15:43, , 8F
acrylamide?
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08/04 17:42, , 9F
先前遇過漏的問題, 有可能是在膠與玻璃產生間隙導致,但
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08/04 17:43, , 10F
不影響跑膠結果
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08/04 21:33, , 11F
我用原廠comb有時也有這種問題
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推
08/05 13:03, , 12F
齒梳大小有差 太厚會漏膠 以前也遇過
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08/05 14:01, , 13F
所以覺的是comb,而不是做膠本身試劑的問題嗎？
08/05 14:01, 13F
推
08/05 22:46, , 14F
我們實驗室同樣biorad的comb 應該是相同厚度的 厚度卻有
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08/05 22:46, , 15F
點詫異 插comb的時候蠻明顯能感受出來
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推
08/09 11:46, , 16F
我用副廠的器具都不會有這種現象。玻璃片兩邊有清乾淨？
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