[求救] Western transfer 10kda 出現凹狀空白@@

看板Biotech作者 (allthebest)時間9年前 (2015/07/09 16:01), 編輯推噓6(606)
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大家好~ 我條件的部分95v 1h10m 兩片膠分別用0.45和0.2的PVDF在同一台Tank transfer 0.45染ponceus 很ok http://i.imgur.com/catnwjs.png
但0.2的染ponceus 在10KDa的地方出現”凹空白” 而且我疊了另一片0.2 看我有沒有過 tran染ponceus 也出現”凹空白” http://i.imgur.com/GJpcVa6.png
是電壓太高嗎? 希望有人知道這是怎麼回事 QAQ --------------------------------------------------------------------- (FYI 我發現不同實驗室transfer條件 有人調電流 也有調電壓的 我調查到的幾乎都tran 100V 1~2h....) 這個問題我也想搞清楚 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.25.92.166 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1436428914.A.831.html

07/09 16:16, , 1F
長得像sample loading dye?
07/09 16:16, 1F

07/09 16:16, , 2F
我有100V 1hr和320mA 25分的
07/09 16:16, 2F

07/09 16:17, , 3F
長的像 loading dye +1
07/09 16:17, 3F

07/09 21:18, , 4F
這會影響你的結果嗎?
07/09 21:18, 4F

07/10 09:43, , 5F
先把 Ponceau s 拼對吧
07/10 09:43, 5F

07/10 12:32, , 6F
哈哈哈 ponceau s 開心了嗎?樓上
07/10 12:32, 6F

07/10 12:34, , 7F
回樓樓上因為我要壓的是11KDa 所以怕怕的
07/10 12:34, 7F

07/10 22:25, , 8F
loading dye+1. 我們家是100v 50min,17kda 沒問題
07/10 22:25, 8F

07/10 22:27, , 9F
transfer條件百百種 除非超大分子 不然你說的條件
07/10 22:27, 9F

07/10 22:31, , 10F
應該都可
07/10 22:31, 10F

07/11 14:47, , 11F
Sample量降低會不會好點?
07/11 14:47, 11F

08/29 18:52, , 12F
我也會有這種現象 可是不影響結果捏
08/29 18:52, 12F
文章代碼(AID): #1LdYfoWn (Biotech)