[求救] 關於IMR32的一些問題

看板Biotech作者 (想要重新開始~~~)時間9年前 (2015/06/16 15:32), 9年前編輯推噓0(008)
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關於IMR32我想問一下這邊有沒有人有做過這株細胞 因為碰到蠻大的問題 所以上來求救 我的培養條件 DMEM(low glucose) + 10% FBS + 2mM L-glutamine, + 1% NEAA + 1% P/S 細胞狀態可以養滿~ 但鏡檢的時候會有不少漂浮的細胞(或是細胞碎片?) 繼代的時候1盤只能分成2盤 因為回load太少的話~細胞會長的很慢~ 就算是1盤分2盤的狀態 通常長滿還是要4天 而且2天時候需要換一次medium 繼代方法沒有用typsin 直接拍一拍他就掉下來了 ((超容易飄 請問這樣的狀況是正常的嘛? 世界消耗medium的阿~ 而且這樣一盤75T養滿的狀態 全部打下來 總共也才 4~5 X 10^6而已 請問有大大們養過這株細胞嘛? 這樣的狀態是正常的嘛? 懇請大家幫忙 謝謝大家了!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 134.208.25.200 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1434439938.A.93C.html

06/16 18:21, , 1F
我有養過這株細胞、但我DMEM是ㄧ般沒有low glucose
06/16 18:21, 1F

06/16 18:24, , 2F
因為這細胞會有像觸角會伸出、所以可能看起來還沒滿盤
06/16 18:24, 2F

06/16 18:24, , 3F
但其實他已經滿盤
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06/16 18:25, , 4F
如果你需要大量細胞、就是多種幾個flask囉!還有他飄
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06/16 18:25, , 5F
來飄去表示狀態已經不是很好了
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06/16 18:26, , 6F
我以前做一次實驗也是分個8~10 flask才夠
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06/16 18:27, , 7F
希望有幫助到你
06/16 18:27, 7F

06/17 16:36, , 8F
我也是用正常的glucose,不過容易飄好像正常
06/17 16:36, 8F
謝謝兩位!!! 那如果我今天要打在裸鼠上面的話 medium是不是要去掉p/s比較好 我查了一下paper 好像一隻裸鼠都需要打到至少 6 X 10^6 ~ 1 X 10^7 左右! 這樣子超消耗75T flask的阿Orz ※ 編輯: kakutsuchi (134.208.25.200), 06/17/2015 17:36:53
文章代碼(AID): #1LVz42ay (Biotech)