[求救] sirt1純化問題

看板Biotech作者時間9年前 (2015/03/25 09:53), 9年前編輯推噓0(0推 0噓 15→)
留言15則, 5人參與, 最新討論串1/1
小弟目前在做sirt1酵素的純化 此酵素是從addgene公司買來的 之後養在BL21 E coli細菌後 經過一般步驟 最後用his tag purification resin進行純化 最後做SDS跑膠時發現我的major band在110kda以上 不過addgene買來的sirt1上面寫大概在81kda 不知道是哪裡出問題 請高手幫忙>< http://i.imgur.com/8WZIInx.jpg
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03/25 10:57, , 1F
有addgene的資料嗎
03/25 10:57, 1F
※ 編輯: dennissnake (101.14.19.58), 03/25/2015 11:03:11
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03/25 11:07, , 2F
sirt1各家Ab染出來的都是110kda附近,81kda是seq predict
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這是addgene的sirt1
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分子量差這麼多是因為他除了his tag外還有其他tag嗎!
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??
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差30kda感覺頗大QQ
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mage/BML-SA427_WB.jpg
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都說FL就110了怎會去懷疑tag，這種情況常有，少見多怪
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FL是什麼意思阿?
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full length
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03/29 22:18, , 14F
那請問有人看過sirt1跑膠結果分子量是110的相關paper
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03/29 22:18, , 15F
嗎 我也覺得我做的是對的 想拿出證據給老師瞧瞧XD
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