[討論] 神經細胞SK-N-SH的生長情況
從ATCC進SK-N-SH(HTB-11)細胞
培養基用ATCC的EMEM(30-2003),添加20% FBS(Gibco)培養
繼代時用0.25%的trypsin切細胞,細胞濃度設定為5x10^5
前面幾代培養時長得很不錯,細胞長長的有長角
http://ppt.cc/0m13
但是經過5~6次繼代後,長角且長長的細胞型態
慢慢轉成短短的小三角細胞
http://ppt.cc/AgM4
請問...這是正常的現象嗎?
還是說神經細胞的繼代要用刮勺刮而不是用trypsin
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因為最近做cytokine(IL-6 & IL-1beta)發現他幾乎都沒有表現
擔心會不會是因為培養不當而導致的
請有養過神經細胞的大家分享一下培養經驗
感激不盡!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.120.104.137
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11/27 01:48, , 1F
11/27 01:48, 1F
當然有看過ATCC的圖與細胞培養說明書,長的都比ATCC的還好,只是這樣的現象不禁讓人懷疑細胞是不是出了什麼問題!
ATCC網站上提供的圖http://www.atcc.org/~/media/Attachments/4/B/9/E/1970.ashx
※ 編輯: leeaman0607 (140.120.104.137), 11/28/2014 19:56:49
有寫信到ATCC去問,但得到的答案都很攏統,像是血清有沒有去補體(沒有),有沒有用ATCC的培養基(是的),還有血清每批的品質不同的答案,還要我去做細胞鑑定= =
網路上也有人提出這樣的疑問,但都沒有得到正面的回應...
http://www.dxy.cn/bbs/thread/22826697#22826697
※ 編輯: leeaman0607 (140.120.104.137), 11/28/2014 20:03:45
※ 編輯: leeaman0607 (140.120.104.137), 11/28/2014 20:06:41