[求救] 菌種鑑定 16S rDNA P不出來
小弟最近在要做乳酸菌菌種鑒定(四株菌)
前面已做過API 50 CHL套組鑑定過生化特性了
菌種鑑定皆為以前學長姐做過的菌種
兩株為L. rhamnosus,另兩株為L. plantrum
也確定他們都有成功(都一次就做好...
所以PRIMER就跟他們用同一組
但是怎麼也P不出來...
想說是不是PRIMER放太久也重新買了一批重跑
由於我們實驗室不是專門做分生
所以也沒對這領域專業的學長姐可以問
但老師要求得做到PCR後才能送定序...
手法問題我也將抽出的DNA測過分光做定量了
然後全程在冰上做 藥劑也抽取完就馬上換TIP
但是奇怪的是只要我P出來有條帶的
他的負控(以無菌水當模板)也會跟著P出條帶...
而另外兩隻plantrum就是乾乾淨淨
什麼條帶都沒有(這組負控沒條帶
想說是不是PRIMER問題
就重新配了一管新的跑出來結果還是一樣
我真的不知道哪裡出問題
方法都照著以前學長姐就是做不出來...
請問板上各位大大能幫我想想辦法嗎?
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