[求救] coverslip養內皮細胞

看板Biotech作者 (childlike107)時間10年前 (2014/04/12 19:52), 編輯推噓1(1推 0噓 6→)
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因為要做confocal實驗,在coverslip上養細胞 最近幾次在coverslip上養內皮細胞(有先coating gelatin), 養的過程都正常,加試劑後也都正常, 但是用DPBS wash 3次後,在coverslip上的細胞有點縮起來, 並整片細胞脫離coverslip, 請問是哪裡出了問題? 因為不是第一次做這個實驗,之前做都很正常 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.123.126.159 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1397303577.A.E6A.html
推
04/12 22:54, , 1F
過去做HUCEV染色實驗，固定之前是不做wash，直接去除medium，
04/12 22:54, 1F
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04/12 23:04, , 2F
再以PFA fix. 印象中若要wash,wash buffer中也會添加某種成分
04/12 23:04, 2F
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04/12 23:06, , 3F
離子 or ? 待找到reference再附上來
04/12 23:06, 3F
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04/13 00:44, , 4F
http://ppt.cc/nbpn PBS with Ca2+Mg2+可避免破壞junction
04/13 00:44, 4F
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04/13 10:57, , 5F
謝謝! 所以細胞treat藥物後,建議不wash直接用
04/13 10:57, 5F
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04/13 10:59, , 6F
formaldehyde固定也可以?
04/13 10:59, 6F
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04/13 13:49, , 7F
固定的時候buffer都要warm...
04/13 13:49, 7F
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