目前實驗要測ROS
看到的方法有滿多種,分別是flow、Fluorescence Spectrophotometer及fluorescence microscopy
我是要用Fluorescence Spectrophotometer來測
而Fluorescence Spectrophotometer又看到兩種作法,分別是
1.以DCFH-DA染色30分鐘後,PBS洗兩次,TE將細胞切下並離心去除染劑,再用PBS回溶細胞
之後load進96 well plate測定。
及
2.以DCFH-DA染色30分鐘後,PBS洗兩次,之後用RIPA(TritonX100)打破細胞,
直接取細胞液進行測定。
想請問各位先進 以Fluorescence Spectrophotometer測定ROS揪竟需不需要破細胞這個動作呢?
請幫我解惑 非常感謝大家
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