[求救] DCFH-DA測ROS

看板Biotech作者 (。)時間10年前 (2014/02/05 18:43), 編輯推噓0(004)
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目前實驗要測ROS 看到的方法有滿多種,分別是flow、Fluorescence Spectrophotometer及fluorescence microscopy 我是要用Fluorescence Spectrophotometer來測 而Fluorescence Spectrophotometer又看到兩種作法,分別是 1.以DCFH-DA染色30分鐘後,PBS洗兩次,TE將細胞切下並離心去除染劑,再用PBS回溶細胞 之後load進96 well plate測定。2.以DCFH-DA染色30分鐘後,PBS洗兩次,之後用RIPA(TritonX100)打破細胞, 直接取細胞液進行測定。 想請問各位先進 以Fluorescence Spectrophotometer測定ROS揪竟需不需要破細胞這個動作呢? 請幫我解惑 非常感謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.104.143

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你這兩個測定都是螢光讀盤的步驟 螢光顯微鏡不需要破細胞
02/06 00:29, 1F

02/06 00:30, , 2F
染完 PBS洗淨後 即可上顯微鏡
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02/06 00:54, , 3F
我是要螢光讀盤測485nm/520nm的,所以方法1.2都可以嗎?
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※ 編輯: bjuh 來自: 114.33.46.67 (02/06 01:00)

02/07 23:30, , 4F
都可
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