[閒聊] 細胞容易集中到中間嗎?

看板Biotech作者 (玻璃做的大叔)時間10年前 (2013/12/29 20:46), 編輯推噓7(7020)
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通常seeding的時候,我會十字交叉搖動,讓所有medium蓋滿dish底部,也避免 細胞不均勻的狀況,但我目前在養的ACL,發現中間會比邊邊要滿得快, 中間都長滿了,邊邊還有空隙,還有生長空間。 我確定那些空隙不是因為phase光徑偏掉的假象,是真的有空隙, 所以我猜要嘛細胞seeding的不均勻,要嘛生長速度不一樣,請問有人遇過這種 現象嗎? -- 起初,他們追殺共產主義者,我沒有說話,因為我不是共產主義者; 接著,他們追殺猶太人,我沒有說話,因為我不是猶太人; 後來,他們追殺工會成員,我沒有說話,因為我不是工會成員; 此後,他們追殺天主教徒,我沒有說話,因為我是新教教徒; 最後,他們奔我而來,卻再也沒有人站起來為我說話了。 《First They Came(他們首次來時)》,Martin Niemoller牧師(1892-1984) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.176.42.46

12/29 22:06, , 1F
基本搖下去這個動作就GG了...
12/29 22:06, 1F

12/29 22:07, , 2F
也不可以拍...
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12/29 22:21, , 3F
為何呢?
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12/29 23:41, , 4F
拿個水盆裝水+不溶的粉末搖一搖就知道了
12/29 23:41, 4F

12/29 23:54, , 5F
那請問Seeding時該怎麼做?
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12/30 00:07, , 6F
請問你seeding的是多大的plate?96-well?!
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12/30 07:13, , 7F
很大力swirl 但不要濺出來
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12/30 07:14, , 8F
上面是6或12 well, 96well我都不動他
12/30 07:14, 8F

12/30 15:46, , 9F
細胞要種得均勻是需要技巧、經驗和嘗試的
12/30 15:46, 9F

12/30 15:47, , 10F
不同well、不同牌子、medium 的量、搖晃方式都會影響
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12/30 15:47, , 11F
十字搖基本上ok 但medium 量要嘗試幾次才能抓到適中
12/30 15:47, 11F

12/30 15:49, , 12F
種下細胞後也要花點時間觀察散布情形
12/30 15:49, 12F

12/30 15:51, , 13F
種得均勻聽起來沒甚麼 做起來卻需要耐心觀察調整
12/30 15:51, 13F

12/30 19:03, , 14F
多大的dish or plate? medium用多少
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12/30 21:47, , 15F
10cm dish,10ml medium。
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12/30 22:22, , 16F
有檢查過incubator是否振動太大嗎?
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12/30 22:22, , 17F
之前遇過會變年輪狀
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12/30 23:08, , 18F
我們家的incubator沒看過震動.....年輪狀是在烘箱coating
12/30 23:08, 18F

12/30 23:08, , 19F
才偶爾會有的現象。
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12/31 16:24, , 20F
年輪狀還蠻利害的感覺...
12/31 16:24, 20F

12/31 18:06, , 21F
年輪狀常看到啊 XD
12/31 18:06, 21F

01/02 17:51, , 22F
品牌 還是有品牌的價值呀!...大陸貨現在真的太多了..
01/02 17:51, 22F

01/03 19:02, , 23F
年輪 coating有問題 就可以出現啦!!
01/03 19:02, 23F

01/04 02:30, , 24F
小well就mix好直接加進去 不要動 放個10分鐘等他貼
01/04 02:30, 24F

01/04 02:32, , 25F
大的dish, 10cm 6cm 前後倒+左右倒(力道要抓一下)
01/04 02:32, 25F

01/04 02:33, , 26F
hood的桌子最好調一下水平 免得有濃度梯度
01/04 02:33, 26F

01/10 06:43, , 27F
關門關太大力就會有年輪
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文章代碼(AID): #1Im1ceO1 (Biotech)