[求救] Raw264.7汙染

看板Biotech作者 (。)時間10年前 (2013/10/28 16:52), 編輯推噓7(7推 0噓 16→)
留言23則, 7人參與, 最新討論串1/1
各位先進大家好 目前我的實驗用到的細胞是Raw264.7這株 前一陣子養的時候都好好的沒有汙染 上星期開始養的細胞每一盤都汙染(大概6,7盤flask) 凍管復活之後培養8小時貼盤後換掉含有DMSO的medium <此步驟綠綠蟲還沒出現 換完medium之後培養大約12小時綠綠蟲就出來了!!! 它們可以被PBS洗掉 但是效果還是有限。 這是顯微鏡下看到的是綠綠蟲 而且游得滿快的 http://imgur.com/DzyTsoR
200x http://imgur.com/LA74hgJ
400x 操作台大清潔、換medium、培養箱換抑黴劑都還是一樣會汙染 想請問大家有遇過這種情況嗎? 後來是怎麼解決的呢? 好煩惱阿綠綠的蟲浪費了我一個星期的時間阿~~~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.104.143
推
10/28 18:16, , 1F
綠綠蟲?你是說背景小黑點還是大隻的?大隻的是Macrophage活
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化變形喔@@"
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推
10/28 18:33, , 3F
會不會是凍管早就污染了??? 之前我們lab沒保好，就會這樣
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10/28 18:50, , 4F
凍管沒問題 我之前作凍管復活都是OK的
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回一樓 我知道大顆的是細胞啦= = 綠綠蟲指的是小小小顆的
10/28 18:50, 5F
推
10/28 20:49, , 6F
pipette man, tip, PBS等都換過新的? 同個incubator只有你的
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10/28 20:50, , 7F
RAW有問題? 同一批凍管之前用都OK? 是否有在使用抗生素?
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10/28 21:17, , 8F
PBS換新的 pipette man, tip都是新的 同個培養箱只有我的有
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汙染，同批凍管之前都OK而且都是我作的 培養箱另外幾盤也都是
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我的凍管 我們家MEDIUM沒有用抗生素 我在想是不是我的MEDIUM
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有問題.....
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推
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把各種有可能的東西拿去培養看看...
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推
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medium是買粉末自己配的嗎? 說不定你配的那一批都有問題,
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可以跟樓上說的將medium/PBS等拿去培養箱養看看.
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若有開/配新的medium也可以先try看看確定問題在哪...
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推
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也請朋友分盤給你 兩人都養同一批來源的細胞 看是不是
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手法操作的問題
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是買粉自己配的~沒有加PS，新配的跟舊的養出來都一樣有蟲蟲
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另一個人配的養出來也是蟲蟲，拿不同人做的凍管養還是蟲蟲
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10/30 23:38, , 20F
medium每次配好我都有習慣直接裝一管在tube中同時放在培養箱
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10/30 23:39, , 21F
測試是否有汙染 新配的跟舊的medium都沒問題 清澈且鏡檢正常
10/30 23:39, 21F
推
10/31 18:30, , 22F
這樣看起來感覺是有部分凍的細胞汙染囉@@
10/31 18:30, 22F
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10/31 22:04, , 23F
FBS是同一批號嗎?曾經有過降的情形是因為FBS不同批號.
10/31 22:04, 23F
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