[求救] 如何利用MDCK養出高titer的病毒

看板Biotech作者 (白夜)時間10年前 (2013/08/29 12:01), 編輯推噓2(206)
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發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 想請問眾位病毒培養高手們 我想利用MDCK來進行PR8的繁殖 目前手邊有作過plaque assay的病毒titer 為0.8x10^5 pfu/ml 以及150T 175T 的FLASK 我應該分別seed多少細胞量以及多少moi下去感染? 還有感染大約幾天後可以收? 才能有效培養出高量的pr8呢(希望目標能有10^7 pfu/ml) 希望能不吝指教 感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.97.113

08/30 20:56, , 1F
我用連續種蛋也只到2x10^8/ml @w@" 試試0.5moi 75T 3天收??
08/30 20:56, 1F

08/30 20:56, , 2F
放到5天細胞可能死太多
08/30 20:56, 2F

09/03 15:20, , 3F
連續種的意思是? 高m.o.i與低m.o.i去增殖病毒最大的差別在?
09/03 15:20, 3F

09/03 15:21, , 4F
2x10^8 已經比我的好太多囉 XD
09/03 15:21, 4F

09/04 18:31, , 5F
高跟低 大概差在細胞能撐幾天吧? 因為如果細胞死超過一半
09/04 18:31, 5F

09/04 18:32, , 6F
則"活"病毒的數量會減少一些..不過每個病毒都會有個體差異.
09/04 18:32, 6F

09/05 09:29, , 7F
細胞死太多代表活病毒少 所以我收的時候應該flask底部
09/05 09:29, 7F

09/05 09:30, , 8F
都還要貼滿細胞 不過就是貼滿有CPE的那種不正常的細胞囉
09/05 09:30, 8F
文章代碼(AID): #1I7iUR9X (Biotech)