[求救] ELISA測小鼠serum中的cytokine

看板Biotech作者 (sweetE)時間12年前 (2013/07/24 21:52), 編輯推噓2(2推 0噓 4→)
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我是以心臟採血的方式收取小鼠的全血 靜置於4度C冰箱,overnight 隔日離心2000g, 10min, 4度C 取上清液血清,分裝儲存於-20 要做ELISA的時候,將sample（serum）在冰上解凍後 在加入到96well內做ELISA,after sample incubation 2h at 37度之後, 我總共有六個samples,其中一個samples在incubation之後, 凝固成gel了！要用tip才有辦法挖出來. 重點是那個well還是可以測到很高量的cytokine 但是因為也不確定是否會影響detect到的量 所以想要解決這個問題,想請問版上大大會是哪一個步驟造成sample凝固？ 謝謝！！ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 123.195.181.18
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07/24 22:18, , 1F
收全血的時候有加EDTA等抗凝血劑嗎?@@
07/24 22:18, 1F
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07/24 22:18, , 2F
不然就是sample稀釋以後再測ELISA
07/24 22:18, 2F
推
07/24 23:24, , 3F
收serum應該先放室溫讓血先凝結吧, 在離心收serum.
07/24 23:24, 3F
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07/25 01:15, , 4F
收完serum要先放室溫凝固完全，4度C會讓妳得到很多果凍
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07/25 01:17, , 5F
建議要重收血
07/25 01:17, 5F
推
07/26 02:24, , 6F
收的血要嘛放37度C,30分鐘後離心,或放4度C o/n再離心即可
07/26 02:24, 6F
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