[方法] 處理cycloheximide後蛋白的normalization

看板Biotech作者laevulose時間11年前 (2013/06/06 19:13)推噓2(2推 0噓 5→)

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最近念paper看到的實驗作者想看A蛋白是否可以stablize B蛋白於是使用cycloheximide treat細胞 (因為cycloheximide可抑制translation) 作者先對細胞pretreat A蛋白再加入cycloheximide 之後收不同時間的cell lysate做WB偵測B蛋白另外偵測tubulin當作loading control 弔詭的是既然cycloheximide會抑制translation 那不是也會抑制tubilin的translation嗎? 這樣還可以用tubulin來normalize嗎? 還是說因為加的劑量一樣所以tubulin應該會被抑制相同的量(?) 因此一般的housekeeping gene仍然可以拿來做normalize? 還請版上各位先進為小妹解惑謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.84.204

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aceliang

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williamyang

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mesenchymal

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