[求救]關於HUVEC的一些問題

看板Biotech作者 (binbin)時間13年前 (2013/02/23 22:17), 編輯推噓3(3推 0噓 10→)
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最近在養HUVEC, 這株細胞真的很難伺候, 養到快崩潰了 遇到的一些問題如下 1. 剛解凍的細胞貼盤數超少 2. 長出來的細胞型態很醜(核很大,而且細胞週邊破碎) 3. Medium => 剛配時有用HCl下去調pH值到7.2 但是大約過一個禮拜pH值上升到7.9 不知道medium的酸鹼值該如何去維持 (另外想請問用HCl調pH值調過頭再用NaOH調會不會有什麼影響) 以上幾點 希望板上有做HUVEC的大大可以給小妹指點迷津Q_______Q -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.38.0.54
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dish有coating東西嗎? 聽學長姐養要coating gelatin
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有coat 1% gelatin
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推
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medium請用CO2調...詳細請看食工所的資料..網路上都有
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推
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從臍帶分離出來養三、四代後型態常會變。解凍後貼得少，可考慮
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解凍多管至同一flask養，當天先不用離心洗去DMSO，直接以培養
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液稀釋DMSO就放進去養，隔天細胞貼好，再換培養液即可。通常兩
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天換一次培養液至你需要的細胞量，很燒錢。Nature Protocols
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2,481-485(2007)參考看看。HEPES,sodium bicarbonate+CO2都是
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用來穩定培養液pH值的方法。有的實驗室喜歡直接用primary cell
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做實驗。
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Medium我們有加HEPES 穩定pH值很威
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你用什麼樣的medium?
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medium是用M199，加20%的FBS
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※ 編輯: bin28 來自: 114.38.0.54 (02/25 00:11)
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