[求救] 抽plasmid DNA

看板Biotech作者 (飛行在宇宙中的航海者號)時間11年前 (2013/01/22 17:44), 編輯推噓5(505)
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發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- http://www.wretch.cc/album/show.php?i=voyager613&b=8&f=1451756310&p=0 上面是我用Geneaid的kit抽的plasmid DNA, 由左而右是不同的loading量. 我的菌是從-80甘油保存菌株直接挖出來到LB培養O/N後再抽. 但是不管怎麼試,除了一條比較明顯的橫帶是我的plasmid外,上下都會有很多雜質. 不是像一般抽plasmid是很肥的一條這樣. 請問是培養的問題嗎? 還是抽plasmid過程的問題? 謝謝. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 101.12.77.105

01/22 19:25, , 1F
抗生素?
01/22 19:25, 1F

01/22 23:11, , 2F
菌體離心後,上清液確實吸乾淨後再加入PD1試試看
01/22 23:11, 2F

01/22 23:27, , 3F
chromosome殘留有點嚴重~加入PD2之後手輕一些~
01/22 23:27, 3F

01/23 00:19, , 4F
你的solution I有加RNaseA然後放冰箱嘛?!
01/23 00:19, 4F

01/23 06:06, , 5F
樓上,是的.
01/23 06:06, 5F

01/23 07:58, , 6F
原po有測測看OD260/280值嗎? 感覺很多都卡在well上
01/23 07:58, 6F

01/23 19:50, , 7F
well上都是genomic DNA吧?
01/23 19:50, 7F

01/23 21:16, , 8F
genomic DNA+1,kit中三種solution加完後,再搖幾下,
01/23 21:16, 8F

01/23 21:16, , 9F
打斷genomic DNA吧~
01/23 21:16, 9F

01/23 23:41, , 10F
看樣子是搖太大力了....感謝各位.
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文章代碼(AID): #1G_bzWBZ (Biotech)