[閒聊] trypsin會不會切自己啊?

看板Biotech作者 (玻璃做的大叔)時間11年前 (2013/01/09 21:22), 編輯推噓4(406)
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最近才想到,tryspin本身主要是認胺基酸的位置來切,但本身也算是蛋白質的一種, 配的時候也不一定會加其他東西,通常是PBS,偶爾再多一個EDTA, 請問這樣trypsin都不會自爆嗎?還是說本身結構真的沒有R,K露出來? -- 起初,他們追殺共產主義者,我沒有說話,因為我不是共產主義者; 接著,他們追殺猶太人,我沒有說話,因為我不是猶太人; 後來,他們追殺工會成員,我沒有說話,因為我不是工會成員; 此後,他們追殺天主教徒,我沒有說話,因為我是新教教徒; 最後,他們奔我而來,卻再也沒有人站起來為我說話了。 《First They Came(他們首次來時)》,Martin Niemoller牧師(1892-1984) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.176.35.61

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你討論的應該是culture級trypsin,通常會autolysis,因此平常
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1倍trypsin不應該回溫太久或直接浸水缸,甚至用前出冰箱就好
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如果是sequence級的trypsin,就會特別修飾residue增加穩定性
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我應該是culture等級吧!實驗室平常都配10倍約3.5%,通常用一
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兩個月。所以放4度C可以有效延緩自爆速度囉?
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跟pH也有關..做digestive的buffer pH 可以控制切的速率
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trypsin已證實過會自切,所以要低溫保存+EDTA
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trypsin絕對會自切XDDD 但我做MS 37度c 16小時都還ok
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已經有很多paper有提出MS or MSMS 的trpsin peak
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01/10 11:36, , 10F
會切自己 所以之前才有廠商大力在推trypo
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文章代碼(AID): #1GxMyhYK (Biotech)