[方法] Migration assay不均勻

看板Biotech作者 (咩)時間13年前 (2013/01/01 18:39), 編輯推噓2(2推 0噓 15→)
留言17則, 8人參與, 最新討論串1/1
最近做Migration時好時壞 做三重覆會有其中一個幾乎空白,另外兩個正常 (或是更慘..三個都空白) 本來以為會不會是Fibronectin有問題(配錯??) 但是做了9個well,有4-5個是全空白 或是well中間一圈完全沒細胞 如圖: http://ppt.cc/BCIb 請問是否有人遇到過類似的問題 或幫我想想大概有哪裡需要注意的眉角 謝謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.35.0.61 ※ 編輯: spirithorse 來自: 114.35.0.61 (01/01 18:41)
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有氣泡？
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推
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我是中間一大坨細胞= =
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這是用transwell做的嗎?我是不知道fibronectin要幹嘛
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我做的還蠻漂亮的@@~還是做不出~改wound healing看看囉
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簡單又省錢^^
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加入Fibronectin後有敲打plate,確定沒有氣泡
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to instangel..一定要做出來啊!!!
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是用來coating嘛？migration不用摳吧?
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也有賣coating好fibronectin的transwell
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推
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可以換換別家的transwell呀...
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保吉生化學、Coring、BD 都有賣的樣子..我都用過..都不錯!
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這種情況我遇過,跟細胞大小和爬的速度有關,可以試著放久點
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不過我建議不要用這種方法實在太主觀,可以用corningHTS 96W
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最後再去用Calcein AM染,然後讀螢光,客觀又不會被攻擊.
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我之前被reviewers電的很慘.
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insert內的體積加到200 ul,可以減少load 後細胞往insert周
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邊聚集的現象。
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