[討論]Western blot 抗體跑FACS?

看板Biotech作者 (keeny￾ ￾NN )時間13年前 (2012/12/06 06:49), 編輯推噓3(3推 0噓 6→)
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請教各位高手 有沒有人用WB的抗體跑過flow? 我最近遇到一個難解的結果 siRNA KO目標蛋白tetraspanin CD82用WB可以看到>90% KO FACS卻顯示細胞表面CD82沒變化而且flurorescent intensity很弱 感覺有點難解釋(其實是有很多可能啦) 但是要是因為是FACS抗體不好的話我的問題會變簡單許多 所以我想要用WB抗體去跑FACS 大家有沒有甚麼看法? 謝謝指教 -- oh my god!! 我又在枕頭上流口水啦！！ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 150.231.246.1
推
12/06 08:35, , 1F
siRNA會Knock out嗎? 應該是Knock down吧~
12/06 08:35, 1F
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12/06 08:36, , 2F
fluoroscent intensity變弱不就表示有KD了嗎?
12/06 08:36, 2F
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12/06 10:12, , 3F
你有先測試這支抗體可以染完可以用FACS看嗎？
12/06 10:12, 3F
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12/06 10:14, , 4F
實驗應該先比較有無一抗下,2抗染色後有沒差別的測試吧
12/06 10:14, 4F
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12/06 10:16, , 5F
另外沒有所謂WB抗體,只有抗體能適用如WB,ICC,FACS哪些實驗
12/06 10:16, 5F
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12/06 10:38, , 6F
跑FACS建議買專用的,如BD,eBiosciencec或是biolegend
12/06 10:38, 6F
推
12/06 16:31, , 7F
連control組螢光都很弱? 抗體壞掉?
12/06 16:31, 7F
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12/07 00:17, , 8F
thanks for comments.
12/07 00:17, 8F
推
12/14 23:06, , 9F
推"跑FACS建議買專用的"!
12/14 23:06, 9F
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