[求救] JC-1 染 分化的PC12
實驗步驟
1. 準備200 μM JC-1 stock in 230 μL DMSO。務必vortex均勻，其不溶於水。
2. 1 mL warm medium, (約1X10的六次方 cells/mL)
3. 破壞組: CCCP, 1 μL, 50 mM, 37OC五分鐘
4. 受測組:JC-1, 10 μL, 200 μM, 37OC, 5% CO2, (20min)
5. 2mL PBS wash
6. Centrifugation, 600g, 5min
7. 500 μL PBS
8. Flow 分析
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結果如圖:為無名，無音樂。
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=tai3252529y6&b=1&f=1490705797&p=1
(抱歉不會縮網址)
問題在於
我查過文獻
理論上正常的分化PC12
應該只有約10%會是受損的(右下)
但我的卻高達快50%
原先我以為是我操作過程有問題
或分化出問題
但操作第二次以及拿未分化的細胞
也是出現類似情況
我也懷疑過是否JC-1有毒
但降低JC-1濃度後染不上去
請問各位高手
是為什麼會造成這個原因呢?
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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※ 編輯: windwin 來自: 140.112.79.11 (11/20 22:26)