[求救] 請教PCR product電泳遇到smear該如何解決

看板Biotech作者 (陳小文)時間13年前 (2012/11/13 21:00), 編輯推噓2(202)
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各位先進 大家好 最近在PCR上遇到瓶頸,實在無法解決,所以上來請教各位 如圖一 http://0rz.tw/dblVc 10(A primer) 11(B primer) 12(C primer)的部分先前所作之PCR product當作 positive control Reagent、ddH2O、Primer(5’- lable DIG)、Buffer均已換新 圖二 http://0rz.tw/NCaHd 8(A) 9(B) 10(C)的部分為新做的positive control,在10的部分出現了smear, 而5(A) 6(B) 7(C)的部分為NTC,5(A) 7(C)的部分很正常,而6(B)的部分也出現 了smear,不管是有沒有加Sample或是H2O,只要有B這組primer就會出現smear。 請問這個情形下,大家為什麼會出現這樣況狀? Primer為剛新訂回來的 萬分感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.38.226.41

11/13 23:59, , 1F
smear=>降低鎂離子濃度
11/13 23:59, 1F

11/14 19:52, , 2F
沒加sample也會有smear?
11/14 19:52, 2F

11/17 09:43, , 3F
是的!primer錯配?
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anneling溫度調高 ??
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文章代碼(AID): #1GeaI12N (Biotech)