[討論] BCA定量計算問題

看板Biotech作者 (我超強暴)時間13年前 (2012/11/12 19:28), 編輯推噓2(2推 0噓 8→)
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大家好 在做BCA時 Standard curve的濃度為2, 1, 0.5, 0.25, 0.125, 0.0625 mg/mL 未知濃度的樣品稀釋 2X, 4X, 8X, 16X, 32X, 64X, 128X 這七種稀釋倍率 加reagent後 在37度 反應10分鐘 而這7種稀釋倍率的吸光值 皆能落在standard curve裡的話 將每個稀釋倍率的吸光值 帶入standard curve 在乘回稀釋倍率 理論上 每個濃度要差不多才是 可是卻都不相同 所以想請問 到底要選哪一個稀釋倍率為可信的呢? 還有 請問混和 reagent A和B時 需不需要避光呢? 謝謝大家!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.74.19
推
11/12 22:34, , 1F
你如果落在濃度比較低的範圍 就把標準線高濃度的拿掉
11/12 22:34, 1F
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11/12 22:35, , 2F
這是跟拉趨勢線的公式有關 數值越大影響越大
11/12 22:35, 2F
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11/13 04:39, , 3F
不須避光;另外 我做是37度30min,10分鐘會不會太短?
11/13 04:39, 3F
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11/13 10:10, , 4F
所以是要能落在較低濃度的稀釋倍率 比較可信囉?
11/13 10:10, 4F
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11/13 10:11, , 5F
請問為啥每種稀釋倍率回乘後 濃度都不一樣?
11/13 10:11, 5F
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11/13 10:12, , 6F
10分鐘,我讓最高濃度的Standard吸光到0.9多,就不反應
11/13 10:12, 6F
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11/13 12:38, , 7F
反應要多久說明書裡就有寫，照著做吧~
11/13 12:38, 7F
推
11/13 13:29, , 8F
這樣說好了 你的吸光值最好落在標準曲線的中間
11/13 13:29, 8F
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11/13 13:30, , 9F
這樣會比較準一點 另外你可以用你的樣品吸光值做一條
11/13 13:30, 9F
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11/13 13:30, , 10F
標準線 看是不是稀釋有問題
11/13 13:30, 10F
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