[求救] RNA gel 有問題

看板Biotech作者 (大體老屍)時間11年前 (2012/10/22 23:59), 編輯推噓2(2推 0噓 8→)
留言10則, 6人參與, 最新討論串1/1
各位晚安 小弟新手今天第一次抽RNA 抽的是cell monolayer 完全遵照protocol做 經過數次離心要去測濃度 值437ng/ul A260/280=2.03 A260/230=2.03(好像不能高於2?) 為了知道自己抽的RNA是否夠純我去跑gel 50V 30cc 1.5% 照下來發現 18S很清楚 但28S沒看見 想請問大家這樣狀況的原因是什麼 我的想法會不會是sample汙染 或是有抽到DNA 2. 做agrose膠時 染劑本來加2-3ul 結果我加了20ul (整個很黃) 有影響跑膠嗎 我照下來似乎沒什麼差別 (我們不用Etbr) 3. 照下來感覺雜點有點多 不知道是溶不完全還是膠台沒擦乾淨 懇請大家幫忙了 也祝各位實驗操作順利 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.133.119 ※ 編輯: mongi 來自: 140.116.133.119 (10/23 00:01)
推
10/23 00:34, , 1F
內染？我怎麼記得dye都是跟denatured sample放一起？
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10/23 01:44, , 2F
應該是安全染劑
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如果是gDNA汙染會出現在最上方
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你marker情形如何?
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10/23 10:37, , 5F
你是說4.5kb的位置上完全没有訊號？ 安全染劑也只是相對安全
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10/23 12:09, , 6F
是不是RNA降解了？你們有跑marker嗎？marker正常嗎？
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實驗室沒有rna marker,所以直接load sample
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10/24 12:19, , 8F
就算没有RNA marker，用 DNA marker 也是能稍微定位......
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10/24 14:29, , 9F
再抽一次吧，說不定樣本早就掛了
10/24 14:29, 9F
推
10/25 14:44, , 10F
你電泳跑多久?
10/25 14:44, 10F
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