[求救] recombinant protein 的製備

看板Biotech作者 (meilichian)時間13年前 (2012/09/26 22:10), 編輯推噓1(103)
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我想問一些基本的實驗設計問題, 突然被交代一個任務,卻對這方面沒有相關經驗... 我已經萃取了一個天然物的crude extract 跑了Western 確認跟抗體之間有幾條band有反應, 現在我想要排除一些band,只留一條我想要看的band就好。 所以,可以跑2D 分離蛋白質之後, 找一個有興趣的點溶掉,再純化萃取,最後再跑Western 確認是不是只剩下一條band? 或是溶掉之後要做定序,放入vector裡大量表現, 溶掉之後再跑Western做確認? 我覺得我的問題好像很大,可是又不知道從何問起, 很怕東西儀器買了結果不會做,或是根本這樣是行不通的... 謝謝大家。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.135.248.46

09/26 22:21, , 1F
crude extract跟Ab有反應?crude含蛋白質?Ab怎麼認未知物?
09/26 22:21, 1F

09/27 02:15, , 2F
很少聽到用"溶的"描述整段基因選殖的過程 XD
09/27 02:15, 2F

09/27 09:51, , 3F
怎麼確定抗體抓到的是你要的? 未知物怎麼會有抗體?
09/27 09:51, 3F

09/28 08:24, , 4F
您先搞清楚您的實驗基本原理, 再串連可用的實驗方法.
09/28 08:24, 4F
文章代碼(AID): #1GOmo_Bo (Biotech)