[求救] SDS-PAGE分離tissue lysate
我的實驗步驟大略是
先將組織用lysis buffer萃取tissue的蛋白質
lysate先用50kDa的centrifugation脫鹽兼分離,再用30kDa的再次分離。
因為我的目標物在MALDI-TOF中,其碎片訊號為10.9kDa,此訊號出現在30~50kDa的lysate
裡。
想請問有辦法利用SDS-PAGE分離出這範圍的protein嗎?
我該選用幾%的separarte gel?
在發問之前我有試跑過幾片,實驗室學長是說marker等產data再加,所以我是跑一些
standard、30~50kDa、大於50kDa。其中30~50kDa和大於50kDa有重疊的band,會有可能
是分子量太接近導致跑不開嗎?
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我的實驗室內有的marker,外盒和說明書都被已經離開的學長丟了,根本無從得知。
要新添購marker可能還要好一陣子Orz
※ 編輯: Shinn826 來自: 140.128.123.62 (09/19 14:54)
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