[求救] western total Erk有趨勢

看板Biotech作者poulnew (poulnew)時間13年前 (2012/09/16 01:33)推噓3(3推 0噓 2→)

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小弟是新手我跑的total Erk 一直有一個很奇怪的趨勢但是同一批sample帶我的學姊跑就很正常已經做了四次獨立的實驗http://ppt.cc/zGp7 (4th data not shown) 想上來請教各位有可能的原因以下是我的做法概述 ---- 8%膠 60V 3小時 / transfer 100mA 50min 先壓p-Erk (cell signaling,1:2000,mouse) O/N stripping 15 min,wash 10min for 3times, blocking (5% milk) 1hr total Erk (cell signaling, 1:2000 ,rabbit) O/N 我自己的解釋是 stripping 沒完全造成total Erk抗體無法binding 但是有可能嗎?? 因為我也想不到原因了畢竟都跑了四次禮拜一要進行無奈的第五次實驗希望各位能夠救我一下 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.176.13.7

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utadalove

09/16 11:01, , 1^F

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推

Kunzite

09/16 11:43, , 2^F

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推

hangzer

09/16 14:52, , 3^F

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