[求救] 細胞在顯微鏡下拍起來感覺有氣泡?

看板Biotech作者 (XD)時間12年前 (2012/07/10 23:25), 編輯推噓0(0推 0噓 17→)
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以螢光顯微鏡拍細胞(hela cell)時 在phase contrast的鏡頭下常會看到不明的 類似氣泡狀的東西 體積並不小有細胞的1/5或更大 而且都是粘在細胞上的 有時也有點像細胞漲起來一粒那樣 我猜想是以4% paraformaldehyde fix 或染hochest dye後才出現的 因為之前直接拍沒有處理的活細胞並不會有這種情形 不知有版上先進遇過類似情形嗎? 該怎麼改善呢? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.89.5
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07/11 11:05, , 1F
有沒有圖可以放上來?
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07/11 12:28, , 2F
http://ppt.cc/fBdv 氣泡有時候size會更大些
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07/11 20:08, , 3F
blebbing,細胞不健康
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07/11 20:12, , 4F
但是不fix直接拿dish去看並不會有耶 是fix+染核後才會出現@@
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07/11 20:36, , 5F
固定的時候有降溫嘛？
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1.blebbing的速度蠻快的
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2.你是看同一盤,fix看是健康的,fix有問題嗎? 還是看不同盤?
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2.你是看同一盤,fix前是健康的,fix後才有問題嗎?
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07/11 23:44, , 9F
不是同一盤，不過先前做的從沒fix跟染核就沒有這情形，而後
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來為了染核而fix之後，幾乎都會有這問題發生= =，我下次fix
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07/11 23:45, , 11F
前會先看一下情形，btw速度蠻快是多快的呢?我treat我的藥物
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07/11 23:46, , 12F
5分鐘後就拿去fix 15 min，之後染hochest約5 min，時間蠻短
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07/12 05:20, , 13F
染染看hochest 染得到代表時核酸類物質 那就是汙染了
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我猜應該是汙染到微生物
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建議留意細胞生長速度,細胞不健康只能解凍新的
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hochest非常地乾淨，其他的dye染起來也是完全沒問題
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07/12 13:51, , 17F
同一批的細胞我都持續地繼代和做其他實驗(上flow)，都正常
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