[求救] EMSA

看板Biotech作者 (禮拜天的下午)時間13年前 (2012/06/26 14:47), 編輯推噓1(1推 0噓 4→)
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發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 各位版友大家好~ 最近在做EMSA相關的實驗 發現一個問題 我純化的蛋白若加入越多 band 就會 shift的越高 請問該怎麼調整呢? 我的probe長度 200bp 用的是6% native gel 想法: 1. multiple binding sites? 2. oligomerization? 3. probe太長? 改小一點? 4. poly dIdC 多加一些? 先謝謝大家了!!!^^ 只差這個問題 老闆就可以接受我的實驗了>< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.55.233
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06/26 15:38, , 1F
問題在於你想看什麼，蛋白越加shift越高表示 a)有多個蛋白
06/26 15:38, 1F
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06/26 15:39, , 2F
結合序列，b)有non-specific binding，有不同解決方式
06/26 15:39, 2F
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06/26 21:08, , 3F
請教一下 若是nonspecific binding要如何解決呢? 謝謝^^
06/26 21:08, 3F
推
06/27 10:37, , 4F
EMSA只是很粗略的實驗 大概看兩者有無interaction
06/27 10:37, 4F
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06/27 10:37, , 5F
要如何區分專一或非專一是看不出來的
06/27 10:37, 5F
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