[求救] Raw264.7培養問題

看板Biotech作者時間12年前 (2012/05/17 12:22), 編輯推噓4(4推 0噓 15→)
留言19則, 5人參與, 最新討論串1/1
請教養過Raw264.7的善心人士 細胞來源:食科所 培養基:90 % SIGMA 的 DMEM with 4mM L-glutamine, 4500 mg/L Glucose 另加 3.7 g sodium bicarbonate ,10% fetal bovin serum, 1% P/S 問題:1. 每次passage,用medium沖細胞下來,medium顏色從黃色變成粉紅色(變鹼?) 2. 最近解凍完胚了約兩次後,細胞全活化了(長腳,沖不下來) 3. 細胞數密度會影響這細胞活化嗎? 被這細胞搞得有點精神衰弱,急需希望有經驗的善心人士幫忙 拜託各位了 感恩 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.5
推
05/17 13:38, , 1F
這株細胞我養的時候是10%FBS/DMEM 但沒外加Glucose
05/17 13:38, 1F
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05/17 13:38, , 2F
細胞密度不能太大 因為長非常快 大概兩天就跟尿一樣XD
05/17 13:38, 2F
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05/17 13:39, , 3F
我之前會把整個配好的medium再過一次濾杯 確保無菌
05/17 13:39, 3F
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05/17 13:40, , 4F
會長腳要嘛是有汙染要嘛是代數太多囉 希望有幫上忙
05/17 13:40, 4F
推
05/17 13:46, , 5F
你細胞density太高了!這個細胞長很快!一多就被活化就長腳
05/17 13:46, 5F
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05/17 13:59, , 6F
推樓上 細胞數過多也會長腳>"<
05/17 13:59, 6F
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05/17 16:21, , 7F
謝謝大家的意見~大約多少要種多少呢~我是10mm dish養
05/17 16:21, 7F
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05/17 16:24, , 8F
大家是用刮勺繼代培養比較多還是用medium沖洗下來呢
05/17 16:24, 8F
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05/18 01:34, , 9F
想問一下哪來的information說可以沖細胞下來pass?
05/18 01:34, 9F
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05/18 01:35, , 10F
我們都是用刮的, 被activate大多是污染了, 不能用了
05/18 01:35, 10F
推
05/18 02:06, , 11F
啊~~之前給我的實驗室交代要用沖的說...用刮的會長腳..XD
05/18 02:06, 11F
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05/18 02:09, , 12F
10%FBS+90%DMEMHG+1%glutamin, 1拆5去分盤
05/18 02:09, 12F
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05/18 07:30, , 13F
我們用刮的從來沒activate過,去查ATCC or BCRC你就知道了
05/18 07:30, 13F
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05/18 07:32, , 14F
基本上都是要用scrap, 少數人用Tyrpsin但細胞會越來越黏
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05/18 07:34, , 15F
但據我所知食工所pass這株是用沖的XD(用tip
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05/18 07:35, , 16F
但是也不會像你這樣@@
05/18 07:35, 16F
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05/18 11:57, , 17F
細胞型態要變成怎樣才真的不能用?我的是會像眼睛一樣~少許
05/18 11:57, 17F
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05/18 11:57, , 18F
又細又長~T^T
05/18 11:57, 18F
推
05/20 21:45, , 19F
有照片可以看嗎@?
05/20 21:45, 19F
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