[求救] real-time PCR 選到絕對定量?
不好意思有幾個問題想請問大家
1.我使用ABI 7500 機器上Real-time PCR
結果不小心選到絕對定量@@(本來應該要用相對定量)
但我從頭到尾也沒有設過甚麼原始濃度等等之類的東西
請問這樣機器幫我算出來的CT值是可信的嗎?orz
2.另外想問CT值的可信範圍是不是大約在15-35個Cycle左右?
3.我是抽動物組織的RNA翻cDNA後上real-time
我同樣的實驗會重複兩到三次,比如二月犧牲一次,三月犧牲一次
(一樣的實驗,不同批老鼠)
請問我可以二月的組織上一次qPCR,三月的組織上一次qPCR
然後把兩次結果加在一起做成一張圖嗎?
畢竟想早點看到結果,可能二月份的做出來有差異
然後三月份的做一次,兩次結果加在一起這樣
還是應該要二月跟三月抽出來的的RNA一起上real-time比較好?
(但是這樣well好像不夠)
謝謝大家了
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.120.31
→
05/14 21:53, , 1F
05/14 21:53, 1F
推
05/15 01:04, , 2F
05/15 01:04, 2F
→
05/15 01:04, , 3F
05/15 01:04, 3F
→
05/15 01:05, , 4F
05/15 01:05, 4F
→
05/15 01:05, , 5F
05/15 01:05, 5F
→
05/15 01:06, , 6F
05/15 01:06, 6F
推
05/16 21:58, , 7F
05/16 21:58, 7F