[求救] IF免疫染色的E-cadherin怎麼染才好??

看板Biotech作者 (man)時間13年前 (2012/05/14 15:32), 編輯推噓2(2推 0噓 6→)
留言8則, 6人參與, 最新討論串1/1
之前做過其他蛋白的免疫染色 都還滿順利的 pattern也都很OK 最近開始染細胞的E-cadherin 可是都沒辦法像是paper上別人拍的那樣 表現在細胞膜上很清楚的一圈 而是cytosolic的pattern 目前固定的方法 formadehyde 酒精固定都試過 抗體用的是santa cruz 他的datasheet也有放IF的圖 看起來也是膜上 細胞的話有查過別人的paper 這株細胞應該做得出來 而細胞也像paper上寫的 種約3-4分滿 長兩天 形成colony之後去染色 請問有做過EMT的人 幫忙一下嗎?? 感激不盡喔 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.67.245
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05/15 00:50, , 1F
細胞是? 細胞之間有緊密連結嗎?
05/15 00:50, 1F
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05/15 01:11, , 2F
細胞是du145 細胞有形成一團團的緊密連結
05/15 01:11, 2F
推
05/17 10:47, , 3F
試試看細胞不要打洞或許可以喔!!!!
05/17 10:47, 3F
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05/17 21:18, , 4F
用FA做固定的話可以試試看加個Antigen retrival步驟
05/17 21:18, 4F
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07/20 04:47, , 5F
我們實驗室都稱Santa Cruz為Santa Crap...
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07/20 04:49, , 6F
以前試過HUVEC 用Alexis染VE-Cadherin IF蠻漂亮的
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07/20 04:49, , 7F
2% PFA固定15分鐘
07/20 04:49, 7F
推
08/17 21:29, , 8F
可以請問PFA fixed是在37度還是室溫嗎?
08/17 21:29, 8F
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