[方法] pcDNA3.1 plasmid?

看板Biotech作者 (Mylo Xyloto)時間12年前 (2012/05/07 23:46), 編輯推噓1(103)
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目前使用的質體是pcDNA3.1/V5-His-TOPO 實驗上除了接上想ligase的片段外 還需要空的質體 但因為兩端突出的都是T 在接合外來片段都做得蠻順利的 唯獨空質體試了幾種方式 目前都還沒成功: 1. 在原本應該加入外來片段的步驟 改加入DW 2. 改成加入dNTP 想請教版上有沒有人試成功過~ 能不能指正我那邊出了問題O_Q 或是那裡可以改進再試試看! 或是..有沒有人有pcDNA3.1/V5-His-TOPO這個質體(要完全沒插入外來片段的!) (或是TOP 10 E.coli內含這個質體也可!) 我可以附上一杯星巴克(或是價位相當的 任君挑選~)當作答謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.44.145.126

05/08 00:07, , 1F
隨便設計個RE site primer然後dimer起來接上去就好了
05/08 00:07, 1F

05/08 09:06, , 2F
樓上的方法....好棒啊!! 我也要學XD
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05/08 16:49, , 3F
真是奢侈的夢想 XD~~ topo耶...
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05/08 23:22, , 4F
blunting and blunt end ligation
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文章代碼(AID): #1Ff-vV9x (Biotech)