[求救] Roche的dig kit做出來的probe要加多少量

看板Biotech作者 (Fcrescent)時間12年前 (2012/05/04 20:02), 編輯推噓4(4推 0噓 7→)
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我想請問一下, 有沒有人用過Roche的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II 合成的是DNA probe, 我想問的是, 原廠說明probe一次是做20ul, 有人減半使用的嗎? 另外在Hybridization的時候, probe大概要加多少量 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.130.98.144
推
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說明書有對照表，看你當初加的tamplate有多少 算標定
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的有多少，再決定要加多少。只用體積當單位很不科學
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這我知道... 20ul是原廠說明給的probe反應體積, 對照表也是以
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20ul來算濃度, 因為想要減半使用, 所以無法拿捏要下去hybrid
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的量, 外加這是我們Lab第一次使用DIG, 以前都用isotope, 有很
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多不懂的地方, 請包涵, 謝謝
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推
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減半所有的濃度都一樣阿～後續稀釋用一樣的倍數即可。
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所以無論反應體積是20或者10ul, 只要template濃度固定, probe
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的濃度在相同時間條件下都會依樣囉
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推
05/05 10:44, , 10F
我是這樣，做了六個基因效果也不錯。希望你也成功。
05/05 10:44, 10F
推
05/05 17:52, , 11F
要算作用濃度
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