[求救] 有人分離過人類單核球細胞MNC嗎?

看板Biotech作者時間13年前 (2012/04/27 11:19), 編輯推噓1(105)
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因為實驗上的需要 因此我需要抽取人血並分離其中人類單核球細胞 (MNC:mononuclear cell) 並配置condition medium 不過實驗室裡做過的學長姐都已經畢業很久 應該也忘記的差不多了 雖然看的protocol 不過實際上還是有許多問題不太了解 想請有經驗的大大能夠給我一點指點 如果可以是否可以告訴我妳們當初是如何採血的? 一次都採多少去分離呢? 針頭是用軟針嗎? 另外 因為單核球細胞屬於懸浮性的所以用的flask是用一般的75T培養就好嗎? 還是要co膠? 還有許多問題>< 如果有大大願意請多告訴我一點 感謝 (跪拜) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.104.95

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就用一般的針抽就好0.0我是抽一管10ml於Heparin管
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大概會有10^7的細胞數 不過我通常抽出來後就直接加藥
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所以培養我不清楚 不過分離出來之後大概活不到一個禮拜
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以Ficoll-Hypaque離心分離,取中間白色懸浮層分出再用pbs
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以RPMI1640medium+FBS 培養
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可懸浮培養,若培養後細胞有觸手伸出代表已分化為DC或Mac
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文章代碼(AID): #1FcX17Qp (Biotech)