[求救] 請問如何在算細胞前把MEDIUM混均勻?

看板Biotech作者 (玻璃做的大叔)時間13年前 (2012/04/23 21:46), 編輯推噓4(404)
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在取20ul到血球計數室前,如果細胞分布不均勻,取樣自然不準。我除了pipet-aid 來回沖以外,在右手拿pipetman時也會用左手繼續手動vortex,讓medium有漩渦。 但有一次到別的實驗室學另一種細胞的培養時,學姊覺得我算的細胞數異常低(34/一大格 ),於是學姊幫我重算。前面也和我一樣用pipet-aid來回沖,但最後是直接把離心管往 bench上下敲,而這次數目就正常多了,是我計算的4倍多(140/一大格)。 學姐是認為我的"手動vortex"並不會讓細胞往上跑,還是會沉澱。要用敲的比較勻, 同時也認為沉澱其實很快,不用十幾秒就往下面集中了。 不過這樣的做法很容易讓medium跑到蓋子上,medium也容易起泡,我想請問各位 平常也會上下敲嗎?有沒有比較溫和又可以混勻的方式呢? -- 起初,他們追殺共產主義者,我沒有說話,因為我不是共產主義者; 接著,他們追殺猶太人,我沒有說話,因為我不是猶太人; 後來,他們追殺工會成員,我沒有說話,因為我不是工會成員; 此後,他們追殺天主教徒,我沒有說話,因為我是新教教徒; 最後,他們奔我而來,卻再也沒有人站起來為我說話了。 《First They Came(他們首次來時)》,Martin Niemoller牧師(1892-1984) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.176.42.36

04/24 12:46, , 1F
納悶+1我們是用錐形瓶養的,先取1ml,再取1ul去測
04/24 12:46, 1F

04/24 12:47, , 2F
有一次數完覺得不可能這麼少,再取一次細胞數量差三倍...
04/24 12:47, 2F

04/24 21:58, , 3F
離心後用1cc回溶 pipetting後再取一部分出來稀釋再算
04/24 21:58, 3F

04/24 21:59, , 4F
一大格一百多顆 sample多的話會數到天亮吧
04/24 21:59, 4F

04/25 10:10, , 5F
1cc回溶會不會太少?
04/25 10:10, 5F

04/25 14:22, , 6F
看細胞量多少 我也是回溶1cc後 取10ul出來稀釋算
04/25 14:22, 6F

04/25 14:25, , 7F
2x10^6 (cells/ml) 都還不算多 數細胞前取一點稀釋
04/25 14:25, 7F

04/25 14:26, , 8F
打錯 是"7"次方才對
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