[方法] 分析型超高速離心
最近樣品送去做分析型超高速離心測試
得到的結果有點不甚清楚 想詢問板上的板友是否有相關經驗
我的樣品是protein和人造的lipid vesicle同時上機
但是我的樣品看起來其實還是澄清 但不是非常透明有一點白色
上機的分析結果是蛋白質有非常廣的分布(200mega K左右)
結果也許是imply我的東西會跟lipid有interaction
我的推測是lipid本身不具有UV吸收因此看到的訊號應該的確來自於protein
但是我有個很大的問題
一般測UV吸收應該是要完全澄清透明(一般指的是加入了GdmHCL去做denature 在此沒有)
如果有這麼大的分子量 那麼光的dispersion應該非常嚴重 超高速離心的UV分析是如何
避免這樣的情況呢?
就我所知 分析型超高速離心似乎是利用超高速離心然後輔助UVdetector去做 但是詳細
原理不甚瞭解
而且因為我的sample已經是protein + lipiosome 肯定不會是完全的澄清透明(即使肉眼
不可見)
搜尋了網路上的訊息 實在是看不到直接性的資訊 希望有經驗的板友可以告訴我一下
順便再問一個問題 一般的UV detect是加入GdmHCL去做denature然後用吸光係數去定濃度
原則上除了280 nm以外 其他波長的吸收通常不太管他 其中320 nm通常可以用來鑑定是否
有氣泡或者是不溶物 那麼如果我故意不加入GdmHCL 結果320 nm有吸收是代表甚麼呢?
打了很多 麻煩板友的幫忙了! 大感謝!!!
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◆ From: 140.114.44.48
推
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