[方法] Protein Dot Blotting
最近打算做Protein Dot Blotting
在網路上找了一下~還是有許多疑問?
爬文也好像沒有看到這方面的討論
所以想問其他大大有沒有完整的Protocol
目前找到的配方有
TBS:20mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH 7.4
TBS-T:0.05% Tween20 in TBS
BSA/TBS-T:0.1% BSA in TBS-T
使用器具:Bio-Dot and Bio-Dot SF Microfiltration Apparatus
membrane:Immun-Blot PVDF membrane (0.2 um)
目前比較主要的問題有
問題一.
Immun-Blot PVDF membrane 在使用前除了用Methanol處理之外，
不需要再用buffer處理嗎??
問題二.
protein sample 需不需要像在做WB那樣加入Sample buffer然後100度，10分鐘??
如果需要那Sample buffer的配方是否一樣?
目前找到的Protocol
http://tinyurl.com/7bjgdg8
http://tinyurl.com/6ov5gv9
如果有大大能提供更完整更好的Protocol
麻煩請寄到justiskj@gmil.com
請大大麻煩位小弟解答!
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即使是鐘樓怪人
也希望來一場像羅密歐和茱麗葉那樣般的愛戀
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