[求救] 大家的genomic dna都很容易degrade嗎

看板Biotech作者 (sylvia)時間14年前 (2012/04/04 20:11), 編輯推噓4(4推 0噓 8→)
留言12則, 7人參與, 最新討論串1/1
之前要p genomic dna一直p不出來，後來以新鮮抽dna 的有p出來一次10k 但下一次要做的時候想要做正對照，p出來卻是smear!!! 做法跟前一次完全一樣 唯一想到的就是dna degrade了 可是中間我也才冷凍解凍一次而已..... 請問大家的genomic dna有那麼容易degrade嗎? 另外，第二次我用的是分裝後的dna，有可能是因為分裝不均勻嗎？ (我是用labturbo這套kit抽的，elute在cceb裡面） 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.230.50.234 ※ 編輯: sylvialalala 來自: 61.230.50.234 (04/04 20:15)
推
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鹽濃度也會影響 可以分批稀釋去P看看
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推
04/04 22:03, , 2F
我之前GENOME DNA放兩年也還很好用
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推
04/04 22:34, , 3F
smear-->降低Mg2+濃度超有效!
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04/04 23:17, , 4F
謝謝樓上！！我明天會試試看！！
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.....稀釋10倍看看
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04/05 22:44, , 6F
PCR之前DNA要定量跟稀釋
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04/06 00:15, , 7F
今天試過了鎂離子還是p不出來～我dna只有下30 ng而已
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這樣還要稀釋嗎？
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04/08 00:25, , 9F
Genomic DNA一般情況來說不是那麼容易degrade，除非存放
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的buffer有問題。用其它組成功過的primers若還是p不出來
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，可能就真的是DNA本身發生問題了。你PCR的band是smear
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還是faint？faint還有救，smear就…
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