[求救] western blotband位置怪怪的

看板Biotech作者 ((???))時間12年前 (2012/03/26 17:23), 編輯推噓2(2推 0噓 5→)
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最近作western blotting band的位置和marker的位置一直都差很多 本來以為是stacking gel太淺了 才會這樣 所以這一次故意配比較厚 但結果還是一樣 然後我也有load以前實驗室學長的sample 卻沒有這樣的問題 不知道出了甚麼事? 我的抗體是 COX-2(我有去查過 是可以偵測的) marker 是 Thermo scientific的26616 加入sample buffer會煮5分鐘 拜託救我一下 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.91.69
推
03/26 17:33, , 1F
你的target protein或許被修飾了 或是切割了~
03/26 17:33, 1F
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03/26 18:10, , 2F
那如果減少煮的時間會改善嗎?
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03/26 19:39, , 3F
修飾和切割是在你的實驗內容內 跟煮多久沒關
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可能你的treatment造成蛋白的修飾改變
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03/26 21:53, , 5F
可是因為連control都發生同樣的問題 所以才覺得怪怪的
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03/27 03:24, , 6F
據說是因為細胞特性不同，造成一樓所說，所以CONTROL也會
03/27 03:24, 6F
推
03/27 23:42, , 7F
跑一次沒有Treatment的就知道了
03/27 23:42, 7F
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