co-IP的control組疑問

看板Biotech作者 (virgin)時間14年前 (2012/03/20 12:26), 編輯推噓0(002)
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各位版上的學長學姊好, 我最近要用millipore的catch and release v2.0 system進行co-IP的實驗。 想請問版上的學長姊,我的control應該怎麼做比較好呢? 目前我的想法是: (1) 未經IP的sample:作為loading control,確定IP lane之target protein的位置; (2) 未加入sample之IP mixture:含affinity ligand與antibody, 確定affinity ligand與heavy chain/light chain位置; (3) 未加入antibody之IP mixture:含sample與affinity ligand, 確定IP組別中看到的target protein確實是經antibody specific binding而來的。 請問各位學長姊,這樣的control夠完整嗎?是否有需要再加入什麼組別呢? 另外想請問,有些做co-IP的paper中有IgG control, 請問IgG control是什麼呢? 不好意思問題有點多...懇請版上的學長姐賜教,感激不盡! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.253.121

03/20 12:44, , 1F
一般非kit不會用(2),至於(3)則是加入normal IgG而非Ab未加
03/20 12:44, 1F

03/20 12:45, , 2F
normal IgG或IgG control指的是拿non-specific Ab做為對照
03/20 12:45, 2F
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