[求救] Bradford蛋白質定量

看板Biotech作者 (鳥龍綠半糖少冰)時間14年前 (2011/12/16 17:34), 編輯推噓2(2推 0噓 5→)
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事情是這樣的 我們家的lysis buffer跟sample buffer的配方皆為 Tris-HCl（pH6.8） 100 mM Dithiothreitol（DTT） 200 mM（P.S 要用時才加入） SDS 4 ％ Glycerol 20 ％ 不過之前沒有注意到裡面的SDS濃度為4% 所以買了Bradford protein assay 請問大家有任何改進的方法呢? 降低SDS濃度有無影響呢? 或者有無任何SDS的替代品可用 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.11
推
12/16 17:43, , 1F
稀釋後看和ddH2O吸光值差多少吧
12/16 17:43, 1F
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12/16 17:44, , 2F
我用7M urea 2M thio-urea 還有0.005%BPB 稀釋50x
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12/16 17:45, , 3F
和水的吸光沒差
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12/16 17:57, , 4F
測吸光值用Beer's law換算蛋白質濃度
12/16 17:57, 4F
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12/16 18:04, , 5F
比較好奇的是檢量線也是要用sample buffer去配嗎?
12/16 18:04, 5F
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12/16 18:04, , 6F
還是用ddH2O去配就好了?另外用96well的線性範圍是?
12/16 18:04, 6F
推
12/19 01:02, , 7F
STD用水就好 變成Sample減去lysis(稀釋的) STD減水
12/19 01:02, 7F
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