[方法] transwell步驟與insert裡細胞染色方法
如題
最近老闆請我用tumor cell line 跟HUVEC做co-culture
希望看看HUVEC在co-culture下的生長情形會不會有所改變
由於從來沒做過co-culture實驗，但我找到一篇paper裡剛好有符合我們要的實驗方法
J Cell Sci. 2003 Mar 15;116(Pt 6):1013-22
裡頭提到的Net-like formation可以觀察huvec養在insert裡在co-culture下生長情形
一樣是用transwell做實驗
我想請問有做過transwell的前輩們
在放細胞時,若使用的medium兩隻細胞都可以養的前提下,要在怎樣的順序下seeding細胞?
1.先各別在chamber seeding tumor cell, insert seeding huvec
隔天貼了以後再把insert直接放在chamber上culture 48hr?
2. 直接把懸浮狀態的tumor cell丟入chamber後,把insert放上,再丟入懸浮狀態的huvec
然後culture 48hr?
然後我很疑惑的是裡頭提到染色部份,請問有前輩分享一下insert裡細胞染色除了paper裡
提的公司還有哪些公司生產的染色kit比較推薦嗎?還有這類的染劑是不是花費的時間都很
短啊?
最後一個問題....有輩也有做過類似的實驗嗎?能否討論一下,沒做過很怕東西買回來出包
謝謝！！
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