很久之前在板上有問過關於細胞冷凍的方法
我們lab目前是仍然是這樣的,有4度/-20度冰箱 和液態氮
之前保存細胞時都是配好90%的DMEM+10%的DMSO
直接放到-20度 1~2小時 之後丟入液態氮
因為之前養的都是3T3,細胞保存密度約有2~5*10^6 /mL
每次解凍雖然沒有細數,不過總之就是細胞仍能健康繼續養的程度
後來在一本"組織工程" (徐善慧老師著)上
看到在液態氮管口放30分鐘就可直接凍入液態氮中的方法
不知道有沒有人試過?
因為最近養的細胞比較珍貴,很怕把他養死
想問的是,為什麼冷凍時medium有時會呈粉紅色,有時候會變成橘色或黃色?
如果變色,細胞會不會死掉??
因為
1.在液態氮管口30分鐘的細胞,要放進去時變成鮮黃色,過段時間在看變有點橘
2.在-20度30分鐘,管口30分鐘在放進去的是粉紅色
3.在-20度1.5小時的也是粉紅色
不過,組1用的是分裝成50mL小管,50mL滿的medium(本來就偏橘)
組2.3用的是50mL小管中最後的5mL(本來就偏粉紅)
想請問板上的強者先進們這些現象是正常的嗎
如果我在一兩天之後解凍這些細胞,測試存活度,和一兩個月後解凍的效果是否相同?
有許多問題希望有人能回覆,非常謝謝!!!
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