[求救] acridine orange 染色

看板Biotech作者 (a213a21)時間14年前 (2011/09/06 12:33), 編輯推噓0(0推 0噓 1→)
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最近用了acridine orange(AO) 來染 acidic vesicular oranganelles(AVOs) 但染完後在顯微鏡下只看到細胞全被染成紅色 都無法看到明顯的AVOs 因為實驗室沒人做過這個染色 protocol也是google查到的 我的做法是 先用 4% parafarmaldehyde 固定細胞30分鐘 PBS 潤洗後再用 0.1% TritonX-100 作用5分鐘 PBS 潤洗兩次後 用 AO (5ug/ml) 染色10分鐘 PBS 潤洗五次後在染DAPI 最後拍照 想請問板上的高手們 這個作法有甚麼地方需要修正的 或是可以分享一下方法 一直失敗真的很悶阿~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.13.115.17
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09/06 22:49, , 1F
很久沒做,印象中不用固定也不用打洞,1 ug/ml,15m, RT.
09/06 22:49, 1F
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